據(jù)世界衛(wèi)生組織的報告,6407
例男性不育患者中,有2.9%的患者的病因為免疫因素,在原發(fā)性不育中,免疫性不育占2.7%,在繼發(fā)性不育中,免疫性不育占4.0%
。免疫性不育的主要問題就是抗精子抗體的出現(xiàn)。而抗精子抗體出現(xiàn)后究竟對精液的質(zhì)量存在哪些實際上的影響呢?
我們選取生殖??凭驮\的精子表面抗體陽性(MAR
法)的男性患者41例,年齡24-40歲,平均32.0歲。另選健康體檢精子表面抗體陰性(MAR法)的男性20名,年齡23-38歲,平均30.5歲,作為對照組。
采用常規(guī)方法留取全部精液于干燥消毒無毒性的杯內(nèi),置37
℃水浴箱內(nèi)液化后
進行檢測。嚴格按照世界衛(wèi)生組織《人類精液及精子一宮頸粘液相互作用實驗室檢驗手冊》(1999
年第四版)[1]
的方法對精液量、pH
值、存活率進行測定;精子密度以及活力則使用西班牙的SCA精液分析儀進行測定;精子形態(tài)使用巴士染色法,以WHO的分類方法進行分類。
取液化后的新鮮精液20μ
l于載玻片上加敏化綿羊紅細胞20μ
l混勻后置室溫15s
;加羊抗人IgG
血清20μ
l,混勻后加蓋玻片;3 min
后置于光學(xué)顯微鏡下鏡檢計數(shù):10min
后重復(fù)計數(shù)1
次。
精
子表面無AsAb
,可見精子在粘附的sRBC間自由泳動。精子表面有AsAb存在,則敏化sRBc粘附于精子并一起扭動,在強陽性情況下,凝塊形成極為巨大,
精子只在標記sRBc
形成的凝塊中扭動。至少計數(shù)100個活動精子,計算粘附有sRBc的活動精子在總活動精子所占的百分比。陽性率R=(粘附sRBc的活動精子/計數(shù)總活動精子數(shù))×100%。①R≤10,判為陰性;②R>10判為陽性;③R≥40,判為強陽性,重點考慮為AsAb引起的免疫性的不育[2]
。
結(jié)果依據(jù)精子表面抗體的陽性率分為三組,即MAR
陰性(組1)20例、MAR陽性(組2)27例、MAR強陽性(組3)14例??咕涌贵w陽性患者在精子存活率、精子活力(a+b)%和正常形態(tài)等方面與抗精子抗體陰性的正常體檢者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);精液量和精子密度與正常體檢者比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
男性精漿中含有幾十種抗原,精子具有抗原性,而且精子是在青春期之后才出現(xiàn)的,因此被視為非己。男性生殖系統(tǒng)具有多種抗原性,理應(yīng)容易引起機體的免疫反應(yīng),從而干擾正常的生殖生理過程。然而,在正常情況下,由于機體具有防止發(fā)生該反應(yīng)的機制——
血睪屏障的存在和精漿免疫抑制活性物質(zhì)的作用,以及生殖道免疫活性細胞的作用,使這些抗原免疫反應(yīng)并不發(fā)生[4]
。
許多因素如長期大量吸煙、激素、細胞因子、抗體、超抗原、粘附分子、免疫細胞、藥物、毒物、高溫、放射線等對精子凋亡和精子質(zhì)量有明顯影響[5]
,而其中的某些病理因素,如
生殖道炎癥、損傷、梗阻等使這些機制遭到破壞,機體就會發(fā)生自身免疫反應(yīng),精子作為一種免疫禁忌細胞可以導(dǎo)致自身及同種異體抗體形成,引起不孕不育及流產(chǎn)[6].
楊介禮等報道的亞臨床型精索靜脈曲張不育患者手術(shù)三個月后抗精子抗體陽性率的由術(shù)前的90.0%
降為28.0%[7]
,亦從另一方面證明了這一點??咕涌贵w是1954
年Wilson和Rumke
首先在男性不育癥患者血清中發(fā)現(xiàn)的。隨著生殖免疫學(xué)的發(fā)展,研究者發(fā)現(xiàn)男性免疫不育血清和精液中均存在多種AsAb
。2000年WHO診斷標準為:性及射精功能正常,在至少一份精液標本中,混合抗球蛋白反應(yīng)試驗或免疫珠試驗(IBT)有不少于50%活動精子表面被覆抗體。原因不明的不育夫婦中,約10%為免疫因素所致。在不育男子中有6%-10
%可在血或精液中查到抗精子抗體。據(jù)WHO報道,體內(nèi)存在抗精子抗體而致不育患者占總不育的20%-30
%。
但是在我國國內(nèi)應(yīng)用MAR
法進行抗精子抗體的檢測并未得到廣泛的重視及開展,因此了解抗精子抗體產(chǎn)生后對精液的質(zhì)量究竟存在哪些實際影響對于臨床應(yīng)用來說具有相當?shù)囊饬x。
根據(jù)我們的研究顯示在精子存活率方面:組1
、組2、組3均值逐漸降低,三組之間比較有顯著性差異;在前向運動精子比率(a+b)%方面:組1、組2、組3均值逐漸降低,三組之間比較有顯著性差異;在精子正常形態(tài)比率方面:組1
與組2
、組3之間比較有顯著性差異,但組2、組3之間比較無顯著性差異。由此可見:抗精子抗體增高,將直接影響精子的存活率,損害精子的運動,并對精子的形態(tài)造成一定的影響,從而使精子的受精能力明顯下降。
從測定的結(jié)果表明抗精子抗體的濃度與精子功能及受精能力受損的嚴重程度直接相關(guān),從而證明對所有男性不育患者普遍性地進行常規(guī)應(yīng)用MAR法篩查精液中的抗精子抗體是非常重要的,應(yīng)該普及該試驗以利于及早診斷和治療男性免疫性不育。
參考文獻
[1] 世界衛(wèi)生組織.人類精液及精子一宮頸粘液相互作用實驗室檢驗手冊[M].4版.1999.
[2] 馬樂,潘柏年,陳寶英.男性不育與輔助生殖技術(shù)[M].1版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:94—99.
[3]潘天明,朱積川,李江源.男科實驗室診斷技術(shù)[M].1版.北京:人民軍醫(yī)出版社,2006:7.
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[5] 王光榮,周曾娣,葛爭鳴.吸煙對精子凋亡的影響[J].現(xiàn)代醫(yī)院,2005,5(5):25—26.
[6] 劉紅杏,龐偉鴻,謝虹橋.精子異?;颊叽贵w催乳素測定的臨床價值[J].現(xiàn)代醫(yī)院,2007,7(7):32.
[7]楊介禮,陳慶存,黃定蒙.亞臨床型精索靜脈曲張不育患者手術(shù)前后精液質(zhì)量、性激素和抗精子抗體的變化:J].實用醫(yī)學(xué)雜志,2009,25(15):2473—2474.
[8]文章轉(zhuǎn)載現(xiàn)代醫(yī)院2010年2月第10卷第2期專業(yè)技術(shù)
[9]文章僅供學(xué)習(xí)與參考